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(一)纖維縱向制片
取試樣一束,以手扯法整理平置,用右手拇指與食指夾取纖維約20到30根,按在載玻片上,用左手覆上蓋玻片,這樣使夾取的纖維平直地按在載玻片上。然后,在載玻片的兩端涂上膠水,使蓋玻片粘著并增加視野的清晰度。
(二)纖維斷面切片制作
Y172哈氏切片器的結構如下圖所示,它主要有兩塊金屬底板,左底板上有凸槽,兩塊底板嚙合時,凸舌和凹槽之間留有一定大小的空隙,試樣就放在空隙中。空隙的正上方,有與空隙大小相一致的小推桿,用精密螺絲控制推桿的位置。切片時,轉動精密螺絲,推桿將纖維從底板的另一面推出,推出的距離(即切片的厚度)由精密螺絲控制。
用哈氏切片器制作纖維斷面切片時的操作步驟如下:
1、取哈氏切片器,旋松定位螺絲,并取去定位銷,將螺座轉到與右底板成垂直的定位(或取下),將左底板從右底板上抽出。
2、取一束試樣纖維,用手扯法整理平直,把一定量的纖維放入左底板的凸槽中,將右底板插入,壓緊纖維,放入的纖維數量以輕拉纖維束時稍有移動為宜。
3、用鋒利的切片(推薦飛鷹刀片)切去露在底板正、反兩面外邊的纖維。
4、轉動螺座恢復到原來位置,用定位銷加以固定,然后旋緊定位螺絲。此時精密螺絲下端的推桿應對放入凸槽中的纖維束的上方。
5、旋轉精密螺絲,使纖維束稍稍伸出金屬底板表面,然后在露出的纖維束上涂上一層薄薄的火棉膠(火棉膠是危險品,現在買不到可以用指甲油替代)。
6、待火棉膠凝固后,用鋒利刀片沿金屬底板表面切下第一片切片。在切片時,刀片應盡可能平考金屬底板(即刀片和金屬底板間夾角要小)并保持兩者間夾角不變。由于第一片切片厚度無法控制,一般舍去不用。從第二片開始做正式試樣切片,切片厚度可由精密螺絲控制(大概旋轉精密螺絲刻度上的一格左右),用精密螺絲推出試樣,涂上火棉膠,進行火棉膠進行切片,選擇好的切片作為正式試樣。
7、把切片放在滴有甘油的載玻片上,蓋上蓋玻片,在載玻片上貼上試樣名稱標記,然后放在顯微鏡下觀察。
注意點:
①.注意切片制作時羊毛切取較為方便,細的其他纖維切取較為困難,因此可反其他纖維包在羊毛纖維內進行切片,這樣容易得到好的切片。
②.制作切片時,原則上纖維厚度應小于或等于橫向尺寸(纖維直徑或寬度),以免纖維倒伏,在顯微鏡下觀察到的是一小段一小段的纖維縱向形態。